如何提高飼料中粗蛋白質(zhì)測定的準(zhǔn)確度
蛋白質(zhì)是鑒定飼料質(zhì)量時必測的常規(guī)營養(yǎng)指標(biāo)。目前飼料廠普遍采用的標(biāo)準(zhǔn)方法其實質(zhì)仍是凱氏定氮法，但是由于粗蛋白質(zhì)測定過程相對較復(fù)雜（測定約需3～5小時），很多飼料企業(yè)在實際檢測過程中當(dāng)出現(xiàn)結(jié)果異常時不知道如何去分析;有些操作過程不嚴(yán)密，導(dǎo)致檢測結(jié)果不準(zhǔn)確，給生產(chǎn)企業(yè)造成損失。筆者根據(jù)自己的實踐經(jīng)驗，總結(jié)飼料粗蛋白質(zhì)測定準(zhǔn)確度應(yīng)注意的一些事項。
1凱氏定氮法的基本原理
樣品在催化劑的存在下，用硫酸消煮分解，使蛋白質(zhì)及其他化合物中的氮轉(zhuǎn)化為硫酸銨，硫酸銨在濃堿的作用下放出氨氣，通過蒸餾，氨氣隨汽水順著冷凝管流入硼酸溶液，與之結(jié)合成為四硼酸銨，用鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定，即可測定放出的氨氮量。根據(jù)氮量，乘以特定系數(shù)，一般為6.25（飼料中蛋白質(zhì)平均含氮量為16%），即可得出樣品中粗蛋白質(zhì)含量。
2操作過程中應(yīng)注意的事項
2.1消化時應(yīng)在凱氏瓶中加幾粒玻璃珠，以防消化時硫酸暴沸液體濺失，并在凱氏瓶口上蓋一小漏斗使蒸汽凝結(jié)回流，這樣會使消化完全。
2.2開始消化要用小火，待樣品焦化，泡沫消失后，逐步緩慢加強火力，消化過程中經(jīng)常轉(zhuǎn)動凱氏瓶，將濺到瓶壁上的黑渣全部浸入凱氏燒瓶底部的硫酸溶液內(nèi)，以避免消化不完全。消化時要控制好溫度，380℃較好，過低消化時間長，且不完全;過高會引起氮的損失。由于電爐不好控制溫度，最好使用可調(diào)電爐或功率為800w的電爐。
2.3消化液達到透明并非表明樣品已經(jīng)消化完全，為防止測定結(jié)果偏低，需要進一步加熱補充消化至少2小時。
2.4在樣品停止加熱后，如冷卻時間過長易引起硫酸樣液凝結(jié)不易溶解（尤其冬天季節(jié)），故應(yīng)冷卻至不燙手時加入少量蒸餾水（約20mL），搖動凱氏瓶，轉(zhuǎn)移到容量瓶中，冷卻，定容。但要注意水與熱硫酸的劇烈反應(yīng)，以免凱氏瓶破裂。
2.5樣液加入蒸餾裝置后，應(yīng)先用棒狀玻璃塞封口，并加水密封，防止漏氣。然后再加入堿液，這個順序不能弄錯，否則會造成測定結(jié)果偏低。同時要注意堿液要緩慢加入，不可太快。
2.6滴定用的鹽酸標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液必須準(zhǔn)確，使用前應(yīng)將溶劑瓶上下?lián)u動幾次，保證溶液濃度均勻一致。滴定時注意排空滴定管底部的氣泡，確保滴定結(jié)果準(zhǔn)確。
摘自：河南畜牧獸醫(yī)
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